弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）!每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min！每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值.结果判断绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值!FORRESEARCHUSEONLY!

　　洗板方法手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次!自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。操作步骤从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃!设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min!

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　　血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清!保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻!自备物品酶标仪（450nm）加样器及枪头：0！5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟！

　　8，严格按照说明书的操作方法进行操作！说明书以英文说明书为主！自备物品酶标仪（450nm）。加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.37℃恒温箱。免责声明试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担！样品收集、处理及保存方法血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

　　8，严格按照说明书的操作方法进行操作。说明书以英文说明书为主!自备物品酶标仪（450nm）!加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL！37℃恒温箱!免责声明试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责!严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担!小鼠白蛋白(ALB)ELISA试剂盒小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒小鼠丙二醛ELISA试剂盒小鼠谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒小鼠总抗氧化能力（T-AOC）ELISA试剂盒小鼠总胆固醇（TC）ELISA试剂盒小鼠胰岛素生长因子1（IGF1）ELISA试剂盒小鼠胃泌素(GAS）ELISA试剂盒人白介素1β(IL1β)ELISA试剂盒人碱性成纤维生长因子（bfGf）ELISA试剂盒FORRESEARCHUSEONLY.

　　操作步骤：1，试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温!2，实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质.3，不用的其它试剂应包装好或盖好！4，使用一次性的吸头以免交叉污染，避免使用带金属部分的加样器.5，使用干净的塑料容器配置洗涤液.使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6，洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水！7，避免长时间打开盖子.底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下!

　　试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0!3mL*6管0.3mL*6管无样稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书稀释底A6mL3mL无底B6mL无终止液6mL3mL无终止液2张2张无说明书1张无自封袋1张无注:标准品(S0-S5)浓度依次为0，50，200，400，400，4000，8000，40000，8000试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水1:20稀释，即1份20×洗涤缓冲液和19份蒸馏水洗板子的方法手动洗板:甩掉孔内的液体，在每个孔中加入洗涤液，静置1分钟后甩掉孔内的液体，在吸水纸上晾干，洗板5次自动洗衣机:每个孔注入洗衣液350μL，浸泡1min，洗衣板5次操作步骤从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需的板条，其馀板条用自封袋密封返回4℃设置标准产品孔和样品孔，标准产品孔各加入不同浓度的标准产品50μL样品孔先加样品10μL，再加样品稀释液40μL的空白孔除了空白孔之外，在标准品孔和样品孔中的每个孔中添加辛辣的根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL，用密封膜密封反应孔，37℃的水浴锅和恒温箱温育60min放弃液体，在吸水纸上晾干，在每个孔里放入洗涤液，静置1min，扔掉洗涤液，在吸水纸上晾干，重复洗板5次(也可以用洗板机洗板)每个孔中加入底物a、b各50μL，37℃避光孵化15min每个孔中加入终止液50μL，15min以内，在450nm波长处测量每个孔的OD值结果判断绘制标准曲线:在Excel工作表中，以标准品浓度为横向坐标，对应OD值为纵向坐标，绘制标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各种样品浓度值试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水!