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深圳市安培生物科技有限公司
生化试剂
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广州减血清细胞培养基在哪买_Gibco无血清细胞生物化工效果好-深圳市安培生物科技有限公司

  • 产品名:Opti-MEM™ I 减血清培养基
  • 产品价格:面议
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产品说明

  无血清培养基的基本配方:基本成分为基础培养基及添加组分两大部分!用于生物制药和疫苗生产的细胞在体外培养时,多数呈贴壁生长或兼性贴壁生长;而当其在无血清、无蛋白培养基中生长时,由于缺乏血清中的各种粘附贴壁因子如纤粘连蛋白、层粘连蛋白、胶原、玻表粘连蛋白,细胞往往以悬浮形式生长。使用方法血清仍是动物细胞培养中基本的添加物,尤其是在原代培养或者细胞生长状况不良时,常常会先使用有血清的培养液进行培养,待细胞生长旺盛以后,再换成无血清培养液。


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  每隔3到5天,当细胞密度达到1×10到3×10细胞/ml,细胞活率在90%时,贮备的适应了无血清培养基的细胞培养物应该再次传代培养.建议备份上一次混合培养的培养物,直到每一次细胞适应了新的混合培养基!每一次减少血清前,可能需要在SFM/有血清混合培养基中进行几次传代。在适应过程中,建议不要让细胞生长过度。这将增加选择亚群的可能性!需要注意,与有血清培养基相比,大部分SFM包含非常少的蛋白质,因而更易于受外界因素的影响!

  特别需要强调的是:配制无血清培养液必须使用高质量的水,如石英玻璃蒸馏器经三次蒸馏或超纯水净化装置制备的水.因为无血清培养基缺乏了血清中天然成分中和毒素、保护细胞的大分子,既便水中的有毒物质含量甚微,也可能对细胞产生致死性损害!这是无血清培养能否成功的关键因素之一。Opti-MEM™I减血清培养基货号:31985070描述Opti-MEMI减血清培养基是一种经过改良的MinimalEssentialMedium(MEM),能够使胎牛血清添加量减少至少50%,而生长速率或形态无变化。


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  还推荐Opti-MEMI培养基与阳离子脂质体转染试剂(如Lipofectamine™试剂)配套使用!Opti-MEMI培养基可用于各种悬浮和贴壁的哺乳动物细胞,包括SpAE-CHO、BHK-2HEK和原代成纤维细胞!针对广泛的细胞培养应用,提供了多种组分的Opti-MEMI改良培养基。这种Opti-MEMI的改良方式如下:包含•L-谷氨酰胺•酚红Opti-MEMI培养基的使用Opti-MEMI减血清培养基是一种内含胰岛素、转铁蛋白、次黄嘌呤、胸苷和微量元素的培养基.

  Opti-MEM™I减血清培养基货号:31985070无血清培养基的优点可避免血清批次间的质量变动,提高细胞培养和实验结果的重复性。避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染!避免血清组分对实验研究的影响!有利于体外培养细胞的分化。可提高产品的表达水平并使细胞产品易于纯化!缺点:细胞在无血清培养基中易受某些机械因素和化学因素的影响,培养基的保存和应用不如传统的合成培养基方便!成本较高。针对性很强,一种无血清培养基仅适合某一类细胞的培养!

  一些类型细胞可直接从包含血清的培养基适应无血清培养基!对于直接适应,接种细胞密度应该:5×10~5×10细胞/ml。当细胞密度达到1×10~3×10细胞/ml时,传代培养细胞。当细胞密度在培养4到7天后达到2×10~4×10细胞/ml时,细胞完全适应了无血清培养基!每隔3~5天,当细胞密度达到1×10~3×10细胞/ml,细胞活率在90%时,贮备的适应了无血清培养基的细胞培养物应该再次传代培养!连续适应——分好几步把细胞从添加血清的培养基转换到无血清培养基(SFM)中,与直接适应相比较,连续适应趋向对于细胞更加温和一些!

  细胞转入无血清培养基培养要有一个适应过程,一般要逐步降低血清浓度,从10%减少到5%,3%,1%,直至无血清培养。在降低过程中要注意观察细胞形态是否发生变化,是否有部分细胞死亡,存活细胞是否还保持原有的功能和生物学特性等!在实验后这些细胞一般不再继续保留,很少有细胞能够长期培养于无血清培养基而不发生改变的!细胞转入无血清培养之前,要留有种子细胞,种子细胞按常规培养于含血清的培养基中,以保证细胞的特性不发生变化!



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