在24小时内吸光度不会发生变化.Ⅲ、细胞增值-毒性检测在96孔板中配置100μL的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时（在37℃，5%CO2的条件下）.向培养板加入10μL不同浓度的待测物质!将培养板在培养箱孵育一段适当的时间（例如：124或48小时）!向每孔加入10μLCCK溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）！将培养板在培养箱内孵育1-4小时！用酶标仪测定在450nm处的吸光度！

　　检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于2,500个/孔(100μL培养基)！如果要使用24孔板或6孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK溶液！⑤如果没有450nm的滤光片，可以使用吸光度在430-490nm之间的滤光片，但是450nm滤光片的检测灵敏度至高!⑥培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不会对检测造成影响!

　　WST-1法：形成的formazan的水溶性好，产品性状为溶液，使用方法为无需预制，检测灵敏度很高，检测时间较短，检测波长为420-480nm，细胞毒性很低,细胞形态不变，试剂稳定性一般，非常合适大批量样品检测，便捷程度便捷。CCK法：形成的formazan的水溶性好，产品性状为1瓶溶液，使用方法为无需预制，检测灵敏度高，检测时间很短，检测波长为430-490nm，细胞毒性很低,细胞形态不变，试剂稳定性很好，非常合适大批量样品检测，便捷程度非常便捷!

　　操作说明Ⅰ、制作标准曲线（测定细胞具体数量时）先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞!按比例（例如：1/2比例）依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做3-5个细胞浓度梯度，每组3-6个复孔！接种后培养2-4小时使细胞贴壁，然后加CCK试剂培养一定时间后测定OD值，制作出一条以细胞数量为横坐标（X轴），OD值为纵坐标（Y轴）的标准曲线.根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量（试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致，便于确定细胞的接种数量以及加入CCK后的培养时间。

南京细胞增殖测定的CCK8试剂盒细胞活性百分比

　　 深圳市安培生物科技有限公司，位于深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1。公司主营生物化工行业，如何了解{推广产品}产品信息详情请拔打热线：19126518388华伟。

　　 深圳市安培生物科技有限公司在生物化工这个行业中，是一家屈指可数的好公司。其主营的产品——细胞增殖及毒性检测CCK8试剂盒，更是在业界中受到广大客户的喜爱。

　　CCK法与其它检测方法之间的比较：MTT法：形成的formazan的水溶性差，产品性状为粉末，使用方法为配成溶液后使用，检测灵敏度高，检测时间较长，检测波长为560-600nm，细胞毒性高,细胞形态完全消失，试剂稳定性一般，可以大批量样品检测，便捷程度一般.XTT法：形成的formazan的水溶性好，产品性状为2瓶溶液，使用方法为现配现用，检测灵敏度很高，检测时间较短，检测波长为420-480nm，细胞毒性很低,细胞形态不变，试剂稳定性较差，非常合适大批量样品检测，便捷程度便捷!

　　CCK用途：药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定等。注意事项：①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK试剂后的培养时间。②有条件的情况下建议采用多通道移液器，可以减少平行孔减的差异.加入CCK试剂时，建议斜贴着培养板壁加，不要插到培养基页面下加，容易产生气泡，会干扰OD值读数!③白细胞可能需要培养较长时间.④当使用标准96孔板时，贴壁细胞的至小接种量至少为1,000个/孔(100μL培养基)!