再分别以0、1120ul将蛋白标准液加入96孔板的1~8标准孔中，在其他样品孔中加入10ul待测样品!分别加PBS定容至20ul.各孔中加入200ulBCA工作液，室温放置2小时！用酶标仪测定蛋白浓度：测定A562，依标准曲线算出蛋白浓度。牛血清白蛋白（BSA）在缓冲液中作用：BSA是酶的稳定剂，防止酶的分解和非特异性吸附；BSA能减轻有些酶的变性，能减轻有些不利环境因素如加热，表面张力及化学因素引起的变性的，可能是因为它结构中有17个二硫键，和一个巯基，巯基的化学反应很活泼，二硫键有抗氧化还原的作用，因此可与多种阳离子，阴离子和小分子结合；BSA能防止酶吸附到管壁而损失.

　　而BSA可以结合缓冲液或底物DNA中抑制限制性内切酶活性的金属离子和其它化学物质！用途：用于生化研究、遗传工程和医药研究用作医药保健食品、调味品维持渗透压、pH缓冲、载体作用在PCR体系中有助于Taq酶的稳定性及活性，可以提高PCR的效率。生产方法：以牛血为原料分离出血清，用硫酸铵分级沉淀后，经辛酸处理精制而得。应用：牛血清白蛋白（BSA）在生化实验中有广泛的应用,例如在WB实验中加入BSA,通过提高溶液中蛋白质的浓度，对酶起保护作用。

　　多肽血小板促生长因子能促细胞分裂，是多肽家庭的主要成员之一，是主要的促细胞增殖因子；成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、神经细胞生长因子等，血清中含量虽很少，但对细胞生长也有一定作用.激素激素对细胞的作用是多方面的。胰岛素：促进细胞摄取葡萄糖和氨基酸，与促细胞分裂有关.类胰岛素生长因子：能与细胞表达的胰岛素受体结合，从而有胰岛素同样的作用!促生长激素：促细胞增殖效应。其他成份氨基酸、葡萄糖、酮酸等对多种营养成分的合成培养基意义不大.

　　每个泳道加5ul.5电泳：加样完毕，选择80V恒压进行电泳，电泳直至溴酚蓝染料前沿到达两胶交界处（一般约20分钟），更换至100V恒压电泳，电泳直至溴酚蓝染料前沿下至凝胶末端处，即停止电泳（一般约为1小时20分钟）!主要成份：蛋白质是牛血清中主要成份.除包括可携带金属离子、脂肪酸和自身是激素类蛋白外主要还有白蛋白，球蛋白.纤维粘连素细胞促进细胞附着；α2巨球蛋白抑制胰蛋白酶的作用；胎牛血清中含胎球蛋白促细胞附着；转铁蛋白能结合铁离子，减少其毒性和被细胞利用！

　　牛血清白蛋白(bovineserumalbumin)简称BSA（标准级）分子量:66kDa等电点为47CAS号:9048-46-8牛血清白蛋白可用于酶联免疫、金（木示）、化学发光、放射免疫等诊断试剂盒中作为封闭试剂，以及生化研究实验中有广泛的应用;血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用载体作用和营养作用，在动物细胞无血清培养中，添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用！牛血清白蛋白级别:生物化学级(forBiochemistry)牛血清白质白质量标准:序号检验项目检验标准1性状浅黄色，白色冻干粉末，无肉眼可见杂质2溶解性试验10%浓度，水中溶解时间，≤15分钟31%水溶液PH5-541%水溶液0D403≤0。

　　155总蛋白含量双缩脲法检测≥95%6总蛋白中BSA纯度电泳法检测≥98%7重金属含量≤10ppm贮存及稳定性:本品贮存于2-8度，保质期:2年牛血清白蛋白（BSA），是牛血清中的一种球蛋白，包含607个氨基酸残基，分子量为6446KDa，等电点为7！牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用。测定蛋白浓度按50：1配置BCA工作液！10ulC液（蛋白标准）+90ulPBS液稀释成0!5mg/ml的蛋白标准液。

江苏干细胞级牛血清白蛋白的标准曲线

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　　牛血清白蛋白（BSA）在SDS-PAGE电泳中使用1制胶:按比例配制分离胶，缓缓地摇动溶液，使激活剂混合均匀，将凝胶溶液平缓地注入两层玻璃极中，再在液面上小心注入一层水，以阻止氧气进入凝胶溶液中，静置40min。同前按比例配制浓缩胶，但混匀溶液时不要过于剧烈以免引入过多地氧气。吸去不连续系统中下层分离胶上的水分，连续平稳的注入凝胶溶液，然后小心插入梳子并注意不得在齿尖留有气泡，静制60min以上以保证完全聚合！

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