类器官模型的典型制备方法，首先要分离出胚胎或多能干细胞，然后将它们培养在一个支持介质(如基质胶或水凝胶)上，使其能够三维生长。3D类器官模型创立于二十世纪九十年代，Lindberg和Pellegrini④等将角膜缘干细胞培养在3T3滋养层细胞上，成功培养出了人源3D眼角膜结构，启动人源细胞三维类器官培养的新领域，但是其应用仍有限!2009年，HansClevers和ToshiroSato③用源于小鼠肠道的成体干细胞培育出微型肠道(mini-guts)类器官，真正开启类器官培养的时代！

　　经典二维细胞培养方法，从1885年德国科学家从鸡胚中分离细胞至今，解决了许多生命科学问题，但是和细胞能够以（zuì）佳生长状态的体内环境并不相同.近年来，为尽可能的模仿细胞在生物体内的生长环境，得到更接近类似于体内生长的细胞,越来越多研究人员开始关注三维细胞、类器官培养技术。20世纪80年代左右，美国劳伦斯伯克利国家实验室的MinaBissell和WilliamOlePeterson①在乳腺癌的研究中发明了三维细胞培养技术,他们的研究发现，以三维培养正常的乳腺上皮细胞形成了腺泡状单层管状结构,同时具有原癌基因激活的乳腺上皮细胞形成了碗状腺泡结构，而这是在2D培养时所观察不到的现象。

　　【3D类细胞培养】类器官（organoids）--通过在体外培养胚胎或成体干细胞，让其增殖分化形成具有一定形态结构及功能的类似于器官的3D细胞团结构.这些细胞结构虽然不是真正意义上的人类器官，但能在结构和功能上模拟真实器官，因此，其在科学研究中发挥着越来越重要的作用。现有的3D培养的球体形成实验：往往缺乏能自我增殖及分化的干细胞和祖细胞！常用的各种动物模型：在某种程度上虽然能模拟人的生理状况，但是由于各种不确定变量的出现，通量的限制，人和动物生理的差别导致动物模型还是有所缺陷，因此需要构建一种能够弥补以上缺陷的生物模型，而3D类器官则很好地符合了这种模型的需要.

　　待胶体成胶后，添加1毫升冰的1XC缓冲溶液，并盖过步骤3的胶溶液，固定15分钟。待15分钟固定后，小心的吸取C缓冲溶液并置换为适合此细胞生长之培养基溶液!将含有细胞的胶于37°C二氧化碳培养箱内进行7~14天的培养，并观察细胞球体的形成，按正常培养基更换频率进行更换操作.C、溶胶与收集细胞球体准备程序小心的将培养基吸取移除，并用1XPBS进行清洗。小心的将1XPBS吸取移除，并添加1毫升冰的D缓冲溶液，盖过胶滴于室温反应5分钟!

　　类器官3D培养基本过程：将永生化的细胞系、原代细胞系、干细胞或外植体等放在基质胶中，以模拟细胞体内生长环境的体外培养方法，然后添加各种生长因子和小分子化合物来诱导分化成不同的类器官!案例分享：A.形成3D肿瘤球体成功案例分享B!Biozellen基质胶被溶解后分离的完整3D细胞结构照片培养后的3D细胞球体，在Biozellen基质胶被试剂盒里面的DBuffer溶解分离后仍然可以得到完整的3D细胞结构á类器官（Organoids）技术：利用干细胞直接诱导生成三维组织模型，具有自我更新和自我组织能力,并且维持了其来源组织的生理结构和功能的特点！

广州人源胃类器官培养需要什么试剂

　　2011年，日本RIKEN发育生物学中心的研究人员，利用类器官培养将胚胎干细胞成功构建成视杯结构(opticcup)。3D类器官培养被杂志选为2013年突破技术，该领域研究人员分别建构出微型大脑、肝芽以及迷你肾.2类器官与肿瘤生物学这些年，类器官培养技术更是广泛运用在肿瘤生物学体外培养，研究癌症的形成；美国纽约冷泉港实验室肿瘤学家Tuveson团队，在2015年和HansClevers④合作共同创建结肠癌肿瘤细胞类器官；其团队更进一步在胰腺癌患者的活体手术取得组织，建构胰腺类器官，作为筛选平台！