由于二维细胞生长环境与体内3D细胞生长环境差距较大，因此2D培养无法提供高质量的细胞用于后续研究和应用！此外，由于二维培养细胞扩增还会受到2D平面表面积的限制（即细胞的生长接触限制），需要频繁采用胰酶消化进行细胞传代，导致细胞培养扩增工作繁琐!胰酶消化还会影响细胞的质量。采用3D细胞培养支架，可以再较长期间内无需胰酶消化，而进行细胞的3D扩增，从而大大提高细胞的质量和提高细胞的培养效率!将贴壁细胞培养在二维平面上，是科学家们过去迫不得已的无奈选择，这种无奈选择使细胞离开了适合其生长分化的体内环境，并调整自己方能重新适应新的二维环境.

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　　目前已有研究表明3D细胞培养具有改变增殖和形态、更能揭示真实的药物反应、捕获表型异质性、正确反应基因表达和细胞行为、模拟肿瘤微环境等特征.3D培养的特点细胞吸附和伸展的程度2D培养中，细胞只在接触面单侧吸附，许多细胞逐步扁平化，有的分烈异常，有的丧失分化表型；3D培养中，细胞的整个表面都可吸附，建立起类似体内的的细胞-基质与细胞-细胞间相互作用。细胞的极性极性对组织的结构和活性分子的定向分泌很重要.

人源化3D细胞培养细胞密度

　　像Transwell这种可通透支持物，是体外重建具有活体极性和分泌功能的上皮细胞3D模型的有用工具!基因表达和mRNA剪切黑色素瘤细胞3D培养基因上调的模式和在体内的肿瘤中一致；而2D培养时会展现出与上面不同的特别基因表达模式.细胞培养方式还会影响到整合素mRNA的表达和蛋白的生物合成.3D培养的类型3D细胞培养的主要方法有：依赖支架的固体支架技术、水凝胶技术，以及不依赖支架的低粘附力培养皿/板、悬滴板、旋转生物发生器、磁性3D生物打印!

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